В хімії розведенням називають процес, в результаті якого зменшується концентрація речовини в розчині. Послідовне розведення складається з повторних розведень, що дозволяє дуже швидко зменшити первісну концентрацію.[1] цей метод використовується в експериментах, в яких потрібні сильно розбавлені розчини з точною концентрацією, часто визначається за логарифмічною шкалою, або коли необхідно знайти щільність бактерій. Послідовне розведення широко застосовується в експериментальних науках, таких як біохімія, мікробіологія, фармакологія, Фізика.
Кроки
Метод1 З 2:
Послідовне розведення
Метод1 З 2:
- Виберіть відповідний розчинник.при розведенні дуже важливо вибрати правильний розчинник, або буфер. Багато розчини можна розводити дистильованою водою, однак це не завжди так. Якщо ви розбавляєте бактерії або інші клітини, вам знадобиться відповідне культурне середовище.[2] вибраний буфер слід використовувати при всіх послідовних розведеннях.
- Якщо ви не впевнені в тому, що краще використовувати в якості буфера, запитайте у вчителя або пошукайте потрібну інформацію в Інтернеті: можливо, хтось вже готував подібний розчин.
- Приготуйте кілька пробірок з 9 мілілітрами буфера.ці пробірки зіграють роль заготовок для розведення.[3] ви помістіть розбавляється зразок в першу пробірку, а потім послідовно переллєте розчин в наступні пробірки.
- Перед початком роботи корисно помітити всі використовувані пробірки, щоб не сплутати розчини в процесі розведення.
- Кожна наступна пробірка буде містити в 10 разів менше концентрований розчин, ніж попередня.[4] у першій пробірці концентрація розчину складе 1:10, у другій — 1:100, в третій — 1: 1000, і так далі. Заздалегідь визначте, скільки розведень вам знадобиться, і приготуйте відповідне число пробірок.
- Приготуйте пробірку з хоча б 2 мілілітрами нерозбавленого розчину.для послідовного розведення даним методом потрібно не менше 1 мілілітра нерозбавленого розчину. Якщо є всього лише 1 мілілітр, то у вас не залишиться нерозбавленого розчину. Напишіть на цій пробірціНР (нерозбавлений розчин).
- Перед кожним розведенням ретельно перемішуйте розчин.[5]
- Проведіть перше розведення. наберіть в піпетку 1 мілілітр нерозбавленого розчину з пробіркиНР і перелийте його в пробірку з позначкою 1: 10, в якій міститься 9 мілілітрів буфера, після чого ретельно перемішайте. В результаті у вас вийде розчин, розбавлений 9 мілілітрами буфера. Таким чином, концентрація розчину зменшиться в 10 разів.
- Приготуйте наступний розчин. для другого послідовного розведення візьміть 1 мілілітр розчину з пробірки 1:10 і додайте до 9 мілілітрів буфера в пробірці 1: 100. Попередньо як слід перемішайте розчин в пробірці 1: 10. Після того як ви додасте розчин в пробірку 1:100, ретельно перемішайте її вміст. В результаті ви розведете розчин з пробірки 1:10, і у вас вийде новий розчин з концентрацією 1:100.
- При необхідності продовжуйте розводити розчин.даний процес можна повторювати скільки завгодно до тих пір, поки ви не досягнете потрібної концентрації. Якщо в експерименті слід визначити залежність від концентрації, можна послідовно приготувати розчини 1, 1:10, 1:100, 1:1000.
Метод2 З 2:
Розрахунок коефіцієнта розведення і кінцевої концентрації
Метод2 З 2:
- ВизначтеКоефіцієнт розведення кінцевого розчину.для цього слід перемножити всі послідовні коефіцієнти розведення. Відповідна формула має наступний вигляд: D t = D 1x D 2x D 3x ... x Dn, де dt — загальний коефіцієнт розведення, Dn — коефіцієнт n-го розведення.[6]
- Припустимо, ви 4 рази провели розведення з співвідношенням 1: 10. Підставимо цей коефіцієнт в формулу і отримаємо DT = 10 x 10 x 10 x 10 = 10.000.
- Таким чином, після останнього розведення в четвертій пробірці вийде розчин 1: 10.000, тобто кінцевий розчин буде в 10.000 менш концентрованим, ніж вихідний (нерозбавлений).
- Визначте концентрацію розчину після розведення.щоб визначити концентрацію розчину після послідовного розведення, необхідно знати вихідну концентрацію. Використовуйте формулу C кінцева = Cвихідна/D, де Cкінцева — концентрація розведеного розчину, Cвихідна — вихідна концентрація, D — визначений вище коефіцієнт розведення.[7]
- Приклад: якщо концентрація вихідного розчину становила 1.000.000 клітин на мілілітр, а коефіцієнт розведення дорівнює 1.000, чому дорівнює концентрація кінцевого розчину?
- Використовуємо формулу:
- Cкінцева = Cвихідна / D
- cкінцева = 1.000.000/1.000
- c кінцева = 1.000 клітин на мілілітр.
- Перевірте розмірність.при проведенні будь-яких розрахунків слід упевнитися, що Ви отримали правильні одиниці виміру.[8] якщо ви почали з кількості клітин на мілілітр, простежте, щоб результат також був отриманий в цих одиницях. Якщо ви проводите розрахунки в проміле (ppm), отримана концентрація також повинна бути виражена в проміле.
Джерела
- ↑ Http://abacus.bates.edu/~ganderso/biology/resources/dilutions.html
- ↑ Http://study.com/academy/lesson/serial-dilution-in-microbiology-calculation-method-technique.html
- ↑ Http://study.com/academy/lesson/serial-dilution-in-microbiology-calculation-method-technique.html
- ↑ Http://biology.kenyon.edu/courses/biol09/tetrahymena/serialdilution2.htm
- ↑ http://scienceprimer.com/serial-dilution
- ↑ Http://abacus.bates.edu/~ganderso/biology/resources/dilutions.html
- ↑ Http://www.ausetute.com.au/dfactor.html
- ↑ Http://www.ausetute.com.au/dfactor.html